肝素-瓊脂糖凝膠6FF產(chǎn)品說(shuō)明:

肝素是一種含硫酸酯的酸性多糖，將它偶聯(lián)到活化的瓊脂糖凝膠上，該填料具有很高的物理化學(xué)穩(wěn)定性。 肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子結(jié)合，所以肝素瓊脂糖凝膠可以用于這類物質(zhì)的純化。

肝素-瓊脂糖凝膠6FF產(chǎn)品特性:

肝素-瓊脂糖凝膠6FF適用范圍
肝素瓊脂糖凝膠用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干擾素、核酸結(jié)合蛋白、限制內(nèi)切酶、凝血酶及類凝血酶等生物大分子的分離純化。

肝素-瓊脂糖凝膠6FF適用范圍使用方法
1.  裝柱
（1） 將所有的試劑和填料達(dá)到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
（2）  根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3:1比例）配成勻漿。
（3） 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液體（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
（4）  用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意不要使用氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
（5）  打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2. 平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。
3.  上樣
（1） 樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心、過(guò)濾后上柱；
（2） 一般用20-50mM,pH7.4-8.0的緩沖液，為避免離子交換的干擾，緩沖液中可以適當(dāng)加50mM-100mM的NaCl,，最常用的為Tris-HCl緩沖液。
4. 洗脫
可以用Ph7.4-8.0的緩沖液加0.2-2M NaCl進(jìn)行階段或者線性洗脫。再生
5. 再生處理
先用0.1M Tris-HClpH7.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積，然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3個(gè)床體積,最后用20%乙醇3個(gè)床體積即可。長(zhǎng)時(shí)間用酸堿洗填料會(huì)是填料的吸附能力下降，所以清洗要盡量縮短時(shí)間

肝素-瓊脂糖凝膠6FF注意事項(xiàng)：
1、 該凝膠從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫，然后再裝柱，以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、 吸附：20-50mM,pH7.4-8.0的緩沖液，為避免離子交換的干擾，緩沖液中可以適當(dāng)加50mM-100mM的NaCl,，最常用的為Tris-HCl緩沖液。
3、 洗脫：可以用pH7.4-8.0的緩沖液加0.2-2M進(jìn)行階段或者線性洗脫。
4、 上樣樣品必須與平衡柱子的緩沖液的pH、電導(dǎo)相同。
5、 不同的樣品，吸附和洗脫方法不相同，可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。
6、 肝素瓊脂糖凝膠親和填料的再生處理方法：先用0.1M Tris-HClpH7.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積，然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3個(gè)床體積,最后用20%乙醇洗 3個(gè)床體積即可。長(zhǎng)時(shí)間用酸堿洗填料會(huì)是填料的吸附能力下降，所以清洗要盡量縮短時(shí)間。
7、 該親和填料保存條件為20%乙醇，4-8℃。

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標(biāo)題:Cell surface heparan sulfate is an attachment receptor for grass carp reovirus

成員:Qian Wang, Hanyue Wang, Xuyang Wang, Cheng Yang, Yongming Li, Lanjie Liao, Zuoyan Zhu, Yaping Wang, Libo He

論文因子:4.6 發(fā)表期刊:iScience pmid:40104073

注意：以上文獻(xiàn) 僅供參考

肝素-瓊脂糖凝膠6FF

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